Der Mikropipetten-Puller Modell P-97 ist ein Puller vom Typ Flaming/Braun für die Herstellung von Mikropipetten, Patch-Pipetten und Mikroinjektionsnadeln.  Während viele der Merkmale des Modells P-87 beibehalten wurden, bietet das Modell P-97 Verbesserungen im mechanischen, elektronischen und Software-Design.  Das Ergebnis ist eine bessere Kontrolle des Ziehprozesses und ein höherer Grad an Reproduzierbarkeit als beim Vorgängermodell.

Die P-97 kombiniert ein bewährtes mechanisches System mit einer hochentwickelten, programmierbaren Mikroprozessorsteuerung.  Diese programmierbare Steuerung der Ziehparameter ermöglicht es dem Forscher, anwendungsspezifische Pipetten aus einem breiten Spektrum von Glaszusammensetzungen und -größen zu entwerfen.

Bei der Konstruktion der P-97 wurde eine Reihe von neuen Funktionen integriert. Eines der auffälligsten ist die Kammer, in der sich der Bereich um den Heizdraht befindet.  Diese Feuchteregelkammer ist so konstruiert, dass die Auswirkungen wechselnder Luftfeuchtigkeit auf die Reproduzierbarkeit der gezogenen Pipetten minimiert werden.   Eine Leistungssteigerung von 25 % gegenüber der Vorgängerversion ermöglicht die Verwendung größerer Heizfilamente, von Glas mit größerem Durchmesser und von Glas mit mehreren Fässern.  Die Metallbacken, die den Heizfaden einklemmen, wurden ebenfalls neu konstruiert, um die Wärmerückhaltung zu minimieren.  Ein Schalter für den Gaszufuhrmodus sorgt für eine erweiterte Kühlung bei Glas mit großem Durchmesser und Multibarrel-Glas.  Ein federbelasteter Klemmmechanismus wurde hinzugefügt, um das Laden von Glas zu erleichtern.  Eine Vakuumfluoreszenzanzeige wurde hinzugefügt, die eine einfache Betrachtung aus jeder Richtung ermöglicht.

Zu den neuen Software-Verbesserungen gehört eine Anzeige der Gesamtzeit, während der die Heizung eingeschaltet ist, um die Programmentwicklung und Fehlerbehebung zu unterstützen.  Es können jetzt bis zu 100 Programme geschrieben und im Speicher abgelegt werden, was die P-97 für mehrere Benutzer noch nützlicher macht.  Diese Programme können jetzt schreibgeschützt werden; diese zusätzliche Sicherheit verhindert, dass Programme versehentlich geändert oder modifiziert werden können.  Wenn ein Programm geschrieben und gespeichert wird, enthält es das Datum, an dem es geschrieben oder bearbeitet wurde.  Der Luftdruck ist als programmierbares Element enthalten.

Die Geschwindigkeit des Glasträgersystems wird gemessen, wenn das Glas unter einer konstanten Belastung weich wird und sich auseinander zu ziehen beginnt.  Die zunehmende Geschwindigkeit des anfänglichen Auseinanderziehens wird durch die Viskosität des Glases bestimmt, die wiederum eine Funktion der Glastemperatur ist.  Die einstellbare Geschwindigkeit ermöglicht die Wahl einer präzisen Glastemperatur als den Punkt, an dem der harte Zug ausgelöst wird.  Der Puller arbeitet nach dem Prinzip der schnellen Abkühlung des Heizfadens, so dass feine Pipettenspitzen mit extrem kurzen Konizitäten entstehen, wodurch steife Mikroelektroden entstehen, die sich zum Abschrägen eignen.  Weitere Vorteile des kurzen Konus sind der reduzierte Spitzenwiderstand und die verringerte kapazitive Kopplung bei zweibarreligen Mikroelektroden.

Die P-97 enthält einen Rampentest, um die Schwierigkeiten bei der Programmanpassung zu überwinden, wenn ein neues Filament installiert wird, oder um die Charakterisierung einer neuen Glas/Filament-Kombination zu erleichtern.  Dieser Test ermöglicht eine schnelle Anpassung der Wärmewerte in etablierten Programmen und liefert Schätzungen für die Festlegung von Wärmeeinstellungen bei der Verwendung neuer Größen oder Zusammensetzungen von Glaskapillaren.

Wie bei allen Geräten von Sutter Instrument wurde die Elektronik mit besonders großer Sorgfalt entworfen, auch hinsichtlich der Minimierung von Störsignalen auf andere Geräte.

Geräteeigenschaften

• Feuchtigkeits-Kontrollkammer
• Programmierbarer Luftdruck
• Bis zu 100 Programme können geschrieben und gespeichert werden
• Schreibschutz und Zeitstempe für Programmel
• Zwei symmetrische Pipetten bei jedem Zug
• Vorprogrammierte Beispielprogramme für intrazelluläre und Patch-Pipetten
• Sonderprogrammierung auf Anfrage
• Rampentest-Selbsttest zur Festlegung von Programm-Wärmeeinstellungen, wenn ein neues Filament oder Glas eingeführt wird
• Konstantstrom-Stromversorgung für Heizelement und Zugmagnet
• Schleifenzugzyklus für die Herstellung von Mikropipetten vom Patch-Typ
• Vakuum-Fluoreszenz-Anzeige
• Unabhängige Luftversorgung mit Feuchtigkeitsregelung und integriertem Filtersystem
• Konsistente und zuverlässige Elektroden mit Spitzendurchmessern von weniger als 0,1 µm
• Kontrolle über die Zeit und den Druck, mit denen die Luft abgegeben wird
• Interner Speichertest
• Optimierte Geschwindigkeitsmessschaltung für maximale Empfindlichkeit und Reproduzierbarkeit
• Qualitätskontrolle, REM-Aufnahme einer Spitze, die mit jedem Abzieher gezogen wird; Kriterium ist die Messung der Spitze kleiner als 0,1 µm und beträgt typischerweise ≈ 0,06 µm

Spezifikationen

Gehäuseabmessungen     53 cm × 36 cm × 30 cm

Gewicht      28 kg

Stromersorgung     115/230 V, 50/60 Hz Netzspannung

Literatur

zu Flaming/Brown-Mikropipetten-Pullern im Allgemeinen:

1. Brown, K.T. and Flaming, D.G. Neurosciences Journal 2:813-827,1977.
2. Flaming, D.G. and Brown, K.T., Journal of Neuroscience Methods 6:91-102. 1982.
3. Brown, K.T. and Flaming, D.G., Advanced Micropipette Techniques for Cell Physiology.  John Wiley and Sons.  Great Britain, 1986. (auch über Science Products erhältlich!)