Sutter Instrument Zweiphotonenmikroskop

Anwendungen

• In-vivo Zwei-Photonenmikroskopie
• Patch-Slice, Mikroskopie an Gewebeproben
• Nicht-horizontale Oberflächenmikroskopie
• Simultane Retina-Stimulation und Zwei-Photonen-Mikroskopie
      (siehe  Euler et al., "Eyecup scope-optical recordings of light stimulus-evoked fluorescence signals in the retina", Pflügers Arch., 2008.)
• Imaging auch am wachen oder anästhesierten Tier
• Immunologie
• Embryologie
• Nicht-horizontale Oberflächenmikroskopie

Produktmerkmale

• Das Objektiv ist um 22 mm in alle drei Raumrichtungen frei bewegbar: X, Y und Z
• Um die optische Achse drehbares Objektiv zur Abbildung nicht-horizontaler Oberflächen und Volumina
• Anpassbares offenes Plattformdesign
• Cambridge Technology XY-Scanner
• Zwei- oder Vierkanal-Detektorsystem mit Hamamatsu-PMTs und Vorverstärkern
• Sutter PS-2 / PS-2 LV Zweikanal-PMT-Netzteil
• Auf National Instruments basierendes Datenerfassungssystem

Das Movable Objective Microscope (MOM) ist ein Zwei-Photonen-Mikroskop, das in Kombination mit einem Ti:Saphir-Laser tief in lebenden Proben abbilden kann. Das MOM-Design ist einzigartig, da es eine dreidimensionale Objektivbewegung und -rotation ermöglicht, so dass die Probe stationär bleibt. Viele hoch angesehene Imaging-Labors auf der ganzen Welt verwenden MOM-Mikroskope, und wir arbeiten ständig mit unseren Kunden zusammen, um das Design an ihre wechselnden Bedürfnisse anzupassen.

Seit 2011 bietet Sutter das MOM-Computersystem mit Software (MCS) an. Das MCS ist so konzipiert, dass die Vorteile des MOM genutzt werden können. Daher wird das MOM in Kombination mit dem MCS zu einem leistungsstarken Werkzeug, das Elektrophysiologie mit groß angelegten Bildgebungsexperimenten in zwei und drei Dimensionen kombinieren kann.

Das opto-mechanische Design des MOM

Das MOM besteht aus zwei unabhängigen Mikroskopen. Die Widefield-Hälfte des Mikroskops besteht aus einer vertikalen Olympus-Beleuchtung, einer Sutter-Xenon-Bogenlampe und einer Kamerahalterung für die Standard-Epifluoreszenz. Die Zwei-Photonen-Seite des Mikroskops bildet den optischen Pfad für die Führung des Anregungslaserlichts vom Tisch nach oben in die galvanometrischen Abtastspiegel und die anschließende Aufweitung des Strahls durch das Abtastobjektiv, der in die Rückseite des Objektivs gerichtet wird. Nach der Zwei-Photonen-Anregung werden die emittierten Photonen durch einen dichroitischen Spiegel unmittelbar oberhalb des Objektivs in den Detektionspfad geleitet. Der Hauptkörper des Mikroskops lässt sich auf einem Schienensystem verschieben, um einen einfachen Zugang zur Probe vor der Abbildung zu ermöglichen.

Das Objektiv kann sowohl in X, Y und Z verschoben als auch um die X-Achse gedreht werden. Zwei bewegliche Spiegel ermöglichen es dem Mikroskop, das Anregungslicht unabhängig von Bewegung oder Ausrichtung effizient zur hinteren Apertur des Objektivs zu leiten. Die verwendeten X-, Y- und Z-Bewegungen sind die gleichen wie beim Mikromanipulator Sutters MP-285, so dass Sie wissen, dass die Bewegungen glatt, feinskalig, driftfrei und hochgradig reproduzierbar sind. Diese Bewegungen ermöglichen die Aufnahme von Z-Stapeln und Mosaikbildern großer Geweberegionen, ohne dass ein beweglicher Tisch erforderlich ist.

Der horizontale Lichtweg ermöglicht die Drehung des Objektivs aus der vertikalen Standardposition. Aufgrund dieser Drehung kann das MOM leicht von einem aufrechten in ein inverses Mikroskop umgebaut und das Objektiv von 0 bis 180 Grad positioniert werden. Diese Positionsfreiheit erlaubt die Abbildung von nicht-horizontalen Flächen und Volumina.

 

Das MOM ist zugleich ein inverses als auch ein aufrechtes Mikroskop; es ist um 180° drehbar.

MOM Scanning-Systeme

In den letzten 10 Jahren hat sich die Scannertechnologie dramatisch verändert: Die Ziele haben sich geändert, was größere Strahlgrößen erfordert, und die Scannertechnologie hat sich weiterentwickelt und bietet zuverlässige Resonanzscanner. Im Gegensatz zu anderen Konstruktionen mit zwei Photonenmikroskopen hat das MOM die Veränderungen in der Scantechnologie durchlebt und sich an diese angepasst. Während dieser gesamten Entwicklung hat Sutter zwei Prinzipien beibehalten. Erstens können bestehende Scopes auf neue Technologien aufgerüstet werden, sobald diese verfügbar sind. Viele der ursprünglichen Zielfernrohre mit 3 mm Galvo-Scannern wurden entweder zu 6 mm Galvo-Scannern oder zu Resonanz-/Galvo-Scannern aufgerüstet. Zweitens liefert Sutter weiterhin die Originaldesigns, falls diese für die aktuelle Forschung benötigt werden. Wir können ein 3mm oder 6mm konventionelles Scan-MOM oder ein Resonanz-/Galvo-Scan-MOM zu wettbewerbsfähigen Preisen anbieten.

Mikroskopie-Software

Seit 2011 bietet Sutter das MOM Computer System and Software (MCS) an. Bevor dieses Software-Paket entwickelt wurde, verließen sich die meisten Anwender auf ScanImage oder MPScope, um gescannte Bilder zu erzeugen. Die Kunden schätzten die Tatsache, dass das MOM mit Open-Source-Freeware arbeiten würde, es schien jedoch auch einen Markt für ein kommerzielles Paket zu geben. Sutter MScan bot eine Reihe von Funktionen, die in den bestehenden Freeware-Paketen nicht verfügbar waren, darunter die Photostimulation und die Möglichkeit, Bildgebung mit elektrophysiologischer Aufzeichnung und Photostimulation zu kombinieren. Als das resonante Scannen populär wurde und keine der Freeware-Pakete das resonante Scannen auf dem MOM unterstützte, ergriffen Sutter und MScan die Initiative. Die neueste Version, MScan 2.0, in Verbindung mit einem schnelleren Datenerfassungssystem ermöglichte es dem MOM, schnelle, resonante Bilder zu erzeugen. Bis heute ist das Sutter MOM mit MScan 2.0 die einzige verfügbare Plattform, die zwischen konventionellem und resonantem Scannen hin- und herschalten kann.

Das MOM® ist seit jeher mit der Freeware ScanImage, der von Karel Svoboda und Mitarbeitern entwickelten Zwei-Photonen-Bildgebungssoftware, kompatibel. Einer der Gründe, warum die MOM-Plattform in ihrer heutigen Form existiert, ist die starke Unterstützung durch die ScanImage-Gemeinschaft. Im Jahr 2014 wurde Vidrio zum Hauptträger für die Unterstützung und Neuentwicklung von ScanImage. Sutter freut sich, Vidrio ScanImage Premium Kunden zur Verfügung zu stellen, die Premium-Support und die neuesten Funktionen wünschen. ScanImage Freeware ist auch weiterhin als SI5 erhältlich. Sutter bietet Pakete an, die die notwendige Datenerfassungs-Hardware enthalten, um das MOM und andere Scan-Mikroskope mit ScanImage Premium oder SI5 zu koppeln.

Das MOM ist mit vier verschiedenen Detektorpfad-Designs erhältlich. Das ursprüngliche 2-Kanal-Pentagon, das zu einem vierkanaligen Detektorpfad werden kann. Der kurze Pfad und der breite Pfad sind zwei Designs, die die Chancen erhöhen, ballistische Photonen einzufangen, indem die erste Sammellinse entweder näher an die hintere Öffnung des Objektivs gebracht wird (kurzer Pfad) oder indem eine Sammellinse mit größerer Öffnung und dichroitischer (breiter Pfad) verwendet wird.

Sutter MOM-Pakete enthalten die gesamte Ausrüstung (ohne den Ti:Saphir-Laser und das Objektiv), die für ein komplettes Abbildungssystem benötigt wird.

Galvanometrische und Resonanz-XY-Scanner von Cambridge Technology
(konventionell mit 3- oder 6-mm-Spiegeln oder resonant mit 5-mm-Spiegeln)

Hamamatsu-Photovervielfacherröhren (PMTs):
R6357 Multialkali- oder H10770PA-40 (GaAsP)-Produkte
(Sutter ist ein autorisierter Wiederverkäufer für Hamamatsu)

Stromversorgungen für PMTs:
Entweder ein Sutter PS-2 (Zweikanal-Hochspannungsnetzteil für R6357 PMTs) oder
Sutter PS-2LV (Zweikanal-Niederspannungs-Netzteil für H10770PA-40 (GaAsP)-PMTs) kann bestellt werden

Hamamatsu-, Sigmann- oder FEMTO-Vorverstärker, die Auswahl variiert je nach Software und Art des Scans

Datenerfassung: National Instruments-Systeme

TECHNISCHE SPEZIFIKATIONEN

MOM UND CONTROLLER
Verfahrweg 22 mm auf allen drei Achsen

MP-285-Steuerung
Niedrig: 0,2 µm/Schritt
Hoch: 0,04 µm/Schritt

MPC-200 Steuerung
0,0625 µm/Schritt

Maximale Geschwindigkeit
MP-285-Steuerung
2,9 mm/s

MPC-200-Steuerung
5,0 mm/s

Langzeit-Stabilität
1-2 µm/h

Antriebsmechanismus
Präzisions-Schneckenradantrieb

Geräte-Kommunikation
MP-285: RS-232 Seriell
MPC-200: USB

Stromversorgung
115/230 Volt
50/60 Hz Netzspanung

LICHTQUELLEN

LAMBDA LS   Lambda LS mit Xenon-Bogenlampe, 300 W. Lebensdauer der Lampe 1000 h (500 h Garantie) je nach Anwendung auch längere Lebesndauer möglich

LS-OF30    Lambda LS mit 300 Watt ozonfreier Lanmpe

HPX-L5    Lambda HPX-L5 Hochleistungs LED-Lichtquelle

LB-421    Lambda 421  Optischer Strahlenkombinierer und Controller

LB-OBC    Lambda OBC  Optischer Strahlenkombinierer

FLED   Lambda FLED

FLED-DC   Zweikanal-Lambda FLED

PS-2/PS-2LV PMT-STROMVERSORGUNG
Stromversorgung 115/230 V 50/60 Hz Netzspannung

MDR-3/MDR-6/MDR-R ANTRIEBSREGLER
Stromversorgung 115/230 V 50/60 Hz Netzspannung

2-Kanal (PMT)-Version

2-Kanal (PMT)-Version

"Short path" 2-Kanal (PMT)-Version

Bestell-Informationen

MOM BASISSYSTEM FÜR 2-PHOTONEN-MIKROSKOPIE
Beinhaltet bewegliches Objektivmikroskop, 2-Kanal-Detektor mit PMTs, Vorverstärker und PS-2-Netzteil, XY-Scanner mit Servoantrieb, Weitfeld-Fluoreszenzeinheit
einschließlich Vertikal-Beleuchtung, Lambda LS 300 Watt Xenon-Bogenlampe, LLG und Lichtleiteradapter, C-Mount für Weitwinkelkamera, Datenerfassungssystem

MOM-3MM MOM-System mit 3 mm XY-Scannern
MOM-6MM MOM-System mit 6-mm-XY-Scannern
MOM-RES-MCS MOM-System mit Resonanzscannern und MCS 2.0
MOM-RES-SIP MOM-System mit Resonanz-Scannern und ScanImage Premium

ZUBEHÖR
MOM-SETUPKIT-M Basis-Tischoptik für das Laserrouting
MOM-ALIGNTOOL MOM-Ausrichtungswerkzeug (nützliches Werkzeug zum Ausrichten des Lasers in MOM-Scopes, insbesondere in solchen mit Resonanzscannern).

Der endgültige Preis hängt vom gewählten Detektorpfad ab und beinhaltet nicht mehrere Geräte, die für ein komplettes 2-Photonen-Mikroskop erforderlich sind (d.h. Ti:Saphir-Laser, Objektiv, Kamera, Trinokularkopf, Tischmontageoptik).

 

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